《草原主要毒害草发生规律与防控技术研究》 2016年8月工作简报 - 科研动态 - 西部草原毒害草研究中心

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《草原主要毒害草发生规律与防控技术研究》 2016年8月工作简报

公益性行业(农业)科研专项
《草原主要毒害草发生规律与防控技术研究》
20168月工作简报

根据《公益性行业(农业)科研专项《草原主要毒害草发生规律与防控技术研究》项目任务书安排要求,2016年8月份做了如下工作:
1藏橐吾地上部分化学成分分离及生物碱专项分离
利用薄层色谱(TLC)、普通柱层析(CC)以及羟丙基葡聚糖凝胶柱层析(Sephadex LH20)等方法,对藏橐吾地上部分二氯甲烷萃取部位中样品D-1、D-2和D-12进行分离,分别得到D-1白色晶体30 mg,D-2白色晶体20 mg以及D-12油状物质20 mg,需NMR进一步分析结构。此外,对藏橐吾地上部分醇浸膏2.3 kg用适量沸水处理,使其呈悬浊液,适量1N盐酸酸化至pH=2。用等量二氯甲烷萃取酸水液,萃取3次后,用5% NaOH溶液调碱至pH=11,等量二氯甲烷萃取,减压回收,得碱性二氯甲烷部分9 g。检测并矫正碱性,用正丁醇做同样萃取处理,得碱性正丁醇部分83.33 g。分别取0.5 g碱性二氯甲烷部分和碱性正丁醇部分留作细胞毒性。同时,用二氯甲烷和甲醇混合液溶解碱性二氯甲烷部分,9 g硅胶(100-200目)干法拌样,90 g硅胶(200-300目)湿法装柱,二氯甲烷:甲醇(100:1-1:1)梯度洗脱,TLC检测合并相同组分12份,对Al-7、Al-10、Al-11以及Al-12进行LH-20处理,以便进行下一步分离纯化。
2)疯草内生真菌Undifilum oxytropis的培养中潮霉素浓度筛选
鉴于多次取0、5、10、15、20、40 µg/mL等6个浓度进行潮霉素浓度筛选试验的结果不理想,添加潮霉素的培养基内生真菌均未生长。本月调整了潮霉素浓度范围,选取了0、1、2、3、4、5 µg/mL等6个浓度进行了潮霉素浓度筛选,结果在0、1、2、3µg/mL几个浓度看到有个别内生真菌生长。根据重复试验,将对此组潮霉素浓度范围再次进行调整。筛选潮霉素的合适浓度以便用于后续突变菌株的选择。
3)甘肃棘豆中苦马豆素提取分离
取甘肃棘豆浸膏1 kg用沸水溶解,总体积约2200 mL,用盐酸调pH=2后,加二氯甲烷进行萃取直至清亮。用NaOH浓溶液将浸膏的酸水液调至pH=10,加二氯甲烷进行5次萃取。二氯甲烷萃取后,加入正丁醇萃取,多次萃取,得浸膏57 g;取14 g正丁醇浸膏用甲醇溶解,加入等质量100-200目硅胶拌样,然后将甲醇挥干、研磨;取200-300目硅胶400 g进行湿法装柱,再将样品进行干法上样;洗脱剂为氯仿:甲醇:氨水:水按体积70:26:2:2的比例配制,洗脱液一共收集72瓶,其中17-61瓶含苦马豆素。
4)新鲜醉马芨芨草急性毒性试验
8月初从内蒙古阿拉善左旗采集的新鲜醉马芨芨草2kg,取200g用料理机将其打成草浆,再加入适量无菌蒸馏水,放入4℃冰箱中冷浸过夜,取出超声30min后用纱布过滤,得到1000mL滤液,折算生药量为0.2g/mL,置于-20℃冰箱中保存备用,用于小鼠急性毒性试验。
5)赴内蒙古阿拉善毒害草防控示范基地考察指导工作
2016年8月8日,农业部公益性行业(农业)科研专项《草原主要毒害草发生规律与防控技术研究》项目组专家西北农林科技大学动物医学院赵宝玉教授、青海大学农牧学院莫重辉教授和研究生一行5人,在内蒙古阿拉善毒害草防控基地项目组负责人达能太的陪同下深入到腾格里示范基地,对示范基地的运行情况、各项示范项目的实施情况、取得成绩进行了实地考察,经过考察对该示范基地的运行情况表示满意,肯定了取得的成绩,对存在的的问题提出了意见和建议。
6)项目组赴青海三江源地区考察天然草原毒害草危害情况
2016年8月15日~8月20日,在公益性行业(农业)科研专项《草原主要毒害草发生规律与防控技术研究》项目首席专家尉亚辉教授的带领下,项目组成员武菊英研究员、赵宝玉教授和莫重辉教授一行4人赴青海三江源地区的玉树州、果洛州和海南州,对天然草原毒害草危害情况进行了考察。

 
7)新疆毒害草监测及调查工作
    于8月下旬分别开展阿什里乡草甸草地区、萨尔达坂乡草原草地区、阿克苏乡荒漠草地3个醉马芨芨草防控试验示范区的秋季监测工作,继续对往年采取的物理、化学和生物防控各处理的群落数量特征进行防控效果测定。同时对今年在萨尔达坂乡核心试验区生物防控区开展的刈割加强型处理,进行群落数量特征监测,对比处理效果。
    继续进行青贮醉马芨芨草微生物乳酸、霉菌和酵母菌含量的检测工作,分析各处理微生物含量变化,为分析青贮对有毒生物碱及牧草营养品质带来的影响奠定基础。同时将处理完毕的醉马芨芨草进行送样检测样品前处理及保存。
    团队成员安沙舟教授、张鲜花副教授分别赴哈密地区、巴州、阿勒泰地区,采用实地考察测定、与当地农牧民和业务人员座谈等形式开展醉马芨芨草发生及危害情况调查,以及其他多种毒害草现状的调研工作。
    继续协助乌鲁木齐市畜牧水产草原站开展草原毒害草监测及调查工作。并组织新疆农业大学李克梅、武红旗等老师对草原病害、虫害等生物灾害的调查、制图及数据库建立进行指导。
8)项目组赴甘肃省天祝藏族自治县开展草原毒害草防控技术培训
2015年8月11日青海大学项目组在赛什斯镇麻渣塘村指导牧民用迈士通灭除1亩棘豆作为示范,取得了明显的防控效果,应赛什斯镇麻渣塘村民的强烈要求,2016年8月3日-5日,青海大学项目组和天祝县赛什斯镇麻渣塘村委会联合在甘肃省天祝藏族自治县开展草原毒害草防控技术培训,天祝藏族自治县赛什斯镇麻渣塘村20名牧民参加了培训。培训会上,青海大学项目组负责人莫重辉教授从棘豆的分布和危害、家畜棘豆中毒的防控技术、疯草灵解毒缓释丸解毒机理与使用注意事项、迈士通的使用方法和注意事项等方面进行详细讲解,使参加培训的牧民了解有关毒害草的危害和如何防控。培训期间青海大学项目组和赛什斯镇麻渣塘村十位牧民签订了《甘肃省天祝藏族自治县黄花棘豆防控技术推广协议》,计划2016年在天祝藏族自治县赛什斯镇麻渣塘村黄花棘豆分布危害严重草原上利用迈士通灭除200-300亩进行防控,并发放迈士通48瓶(200mL/瓶),由牧民根据草场黄花棘豆分布情况进行碰洒。培训结束后,青海大学项目组负责人莫重辉教授和参会的牧民现场参观了2015年8月11日青海大学项目组在赛什斯镇麻渣塘村迈士通灭除黄花棘豆试验地,通过参观发现,黄花棘豆用迈士通灭除1年后,黄花棘豆没有生长,其他优质牧草生长良好,草产量明显增加。本次在甘肃省天祝藏族自治县开展草原毒害草防控技术培训,牧民积极性非常高,取得了预期的效果。
9)青海省海南州、玉树州、果洛州、海北州草原主要毒害草分布情况调查
2016年8月15日-20日,项目首席专家、西北大学尉亚辉教授、西北农林科技大学赵宝玉教授、北京农科院武菊英研究员、青海大学莫重辉教授组成毒害草调查组,行程2400多公里,对青海省海南州、玉树州、果洛州、海北州草原主要毒害草分布情况进行了调查。
2016年8月15日调查组到达海南州兴海县,调查发现兴海县河卡镇、子科滩镇分布的毒害草主要以狼毒为主,同时有大戟狼毒和急弯棘豆分布,狼毒对兴海县河卡镇、子科滩镇两个镇形成严重危害。调查组对青海省果洛藏族自治州玛多县草原毒害草进行调查,玛多县是我国黄河发源地,草原类型主要以高寒草甸为主,草原生态比较脆弱,通过对玛多县草原毒害草分布调查,发现玛多县花石峡镇有少量黄花棘豆分布,玛多县县城周围有大面积的镰形棘豆分布,已形成一定的危害,同时橐吾、茎直黄芪均有分布。玉树州称多县主要分布翠雀、甘肃棘豆、黄花棘豆、狼毒、茎直黄芪、橐吾、马先蒿、车前状垂头菊等毒害草,主要分布在称多县雁口山一带,玉树州玉树市主要分布的毒害草为橐吾、狼毒和黄花棘豆,主要分布在下拉秀镇,特别是橐吾分布面积最大,已对草原生态形成一定危害。
调查组对青海省海南州、玉树州、果洛州部分草原毒害草调查后,对海北州草原主要毒害草防控技术示范基地黄花棘豆试验区进行了迈士通灭除效果调查,通过调查证实,迈士通灭除黄花棘豆后,三年内没有新生黄花棘豆的出现,这结果为防控毒害草大面积蔓延储备技术。
10)黄花棘豆发生规律研究
2016年8月继续进行黄花棘豆发生规律研究,明确发芽前种子处理(低温处理、冷水浸种和砂纸打磨)、不同温度条件对黄花棘豆种子发芽状况的影响,以了解采取化学防控措施后黄花棘豆依靠种子萌发恢复种群数量的潜力,为草地毒害草的防控提供参考。
 

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